如何安全使用二级生物安全柜的操作说明

1. 位置

空气通过前面开口进入生物安全柜的速度大约为0.45m/s。这样速度的定向气 流是极易受到干扰的，包括人员走近生物安全柜所形成的气流，打开窗户，送 风系统调整以及开关门等都可能造成影响。

因此，最为理想的是，二级生物安全柜应位于人员活动，物品流动以及可能会扰乱 气流的地方。在安全柜的后方以及每一个侧面要尽可能留有30cm的空间，以利 用对安全柜的维护。在安全柜的上面应留有30-35cm的空间，以便准确测量空 气通过排风过滤器的速度，并便于排风过滤器的更换。

2. 操作人员

二级生物安全柜如果使用不当，其防护作用就可能大大地受到影响。操作人员在移 动双臂进出安全柜时，需要小心维持前面开口处气流的完整性，双臂应该垂直 地缓慢进出前面的开口。

3.物品放置 二级生物安全柜前面的进气格栅不能被纸，仪器设备或其他物品阻挡。放入安 全柜内的物品应采用70%酒精来消除表面污染。可以在消毒剂浸湿的毛巾上进 行实验，以吸收可能溅出的液滴。

所有物品应尽可能地放在工作台后部靠近工作台边缘的位置，并使其在操作中 不会阻挡候补格栅。可产生气溶胶的设备（例如混匀器，离心机等）应靠近安全 柜的后部放置。像有生物危害性的废弃物袋，盛放废弃吸管的盘子以及吸滤瓶 等体积较大的物品，应该放在安全柜内的某一侧。在工作台面上的实验操作应 该按照从清洁区到污染区的方向进行。 耐高压灭菌的生物危害性废弃物袋以及吸管盛放盘不应放在安全柜的外面，否 则在使用这些物品时双臂就必须频繁进出安全柜，这样会干扰安全柜空气屏障 的完整性，从而影响对人员和物品的防护。

4.操作和维护 大多数二级生物安全柜的设计允许全天24小时工作。研究人员还发现，连续工作有 助于控制实验室中灰尘和颗粒的水平。向房间中排风或通过套管接口与专门的 排风管相连接的一级A1和A2型生物安全柜，在不使用时是可以关闭的。其他如 二级B1和二级B2型生物安全柜，是通过硬管安装的，就必须始终保持空气流动 以维持房间空气的平衡。

在开始工作以前以及完成工作以后，应至少让安全柜工作5分钟来完成"净 化"的过程，应即应留在将污染的空气派出安全柜的时间。

生物安全柜的所有维修工作应该由有资质的专业人员来进行。在生物安全柜操 作中出现的任何故障都应该报告，并应在再次使用之前进行维修。

7. 溢出 实验室中要张贴如何处理溢出物的实验室操作规则，每一位使用实验室的成员 都要阅读并理解这些规程。一旦在生物安全柜中发生由生物学危害的物品溢 出时，应在安全柜出于工作状态下立即进行清理。要使用有效的消毒剂，并在 处理过程中尽可能减少气溶胶的生成。所有接触溢出物品的材料都要进行消 毒/或高压灭菌。

8. 认证 在安装是一季每隔一定时间以后，应由有资质的专业人员按照生产商的说明对 每一台生物安全柜的运行性能以及完整性进行认证，以检查其是否符合国家及 国际的性能标准。安全柜防护效果的评估应该包括对安全柜的完整性，HEPA过 滤器的泄漏，向下气流的速度，正面气流的速度，负压/换气次数，气流的烟 雾模式以及警报和互锁系统进行测试。

还可以选择进行漏电，光照度，紫外线强度，噪声水平以及震动性的测试。在 进行这些测试时，检测人员要经过专门的培训，采用专门的技术和仪器设备。 强烈建议由有资质的专业人员来进行测试。

9. 清洁和消毒 由于剩余的培养基可能会使微生物生长繁殖，因此在实验结束时，包括仪器设 备在内的生物安全柜里的所有物品都应清楚表面污染，并移出安全柜。

在每次使用前后，要清除生物安全柜内表面的污染。工作台面和内壁要用消毒 剂进行擦拭，所用的消毒剂要能够杀死安全柜里可能发现的任何微生物。在每 天试验结束时，应擦拭生物安全柜的工作台面，四周以及玻璃的内外侧等部位 来清除表面的污染。在对目标生物体有效时，可以采用漂白剂溶液或70%酒精 来消毒。在使用如漂白剂等腐蚀性消毒剂后，还必须用无菌水再次进行擦拭。

推荐将安全柜一直维持运行状态。如果要关闭的话，则应在关机前运行5分钟 以净化内部的气体。

10. 清除污染

二级生物安全柜在移动以及更换过滤器之前，必须清除污染。最常用的方法是采用 甲醛蒸汽熏蒸。应该由有资质的专业人员来清除生物安全柜的污染。