一次性使用卫生用品鉴定试验（4）

金黄色葡萄球菌检测方法

(1) 操作步骤

   取样液5ml，加入到50ml SCDLP培养液中，充分混匀，置35℃±2℃培养24 h。自上述增菌液中取1或2接种环，划线接种在血琼脂培养基上，置35℃±2℃培养24h～48 h。在血琼脂平板上该菌菌落呈金黄色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，周围有溶血圈。挑取典型菌落，涂片作革兰染色镜检，金黄色葡萄球菌为革兰阳性球菌，排列成葡萄状，无芽孢与荚膜。镜检符合上列情况应进行下列试验：

注:制作SCDLP培养液可购买我司产品HB5181 SCDLP液体培养基。进行划线接种可购买我司产品HB6235血液琼脂基。

   甘露醇发酵试验：取上述菌落接种甘露醇培养液，置35℃±2℃培养24h，发酵甘露醇产酸者为阳性。

   注：进行菌落接种可选择我司产品GB007甘露醇发酵管。

   血浆凝固酶试验：玻片法：取清洁干燥载玻片，一端滴加一滴生理盐水，另一端滴加一滴兔血浆，挑取菌落分别与生理盐水和血浆混合，5min如血浆内出现团块或颗粒状凝块，而盐 水滴仍呈均匀混浊无凝固则为阳性，如两者均无凝固则为阴性。凡盐水滴与血浆滴均有凝固现象，再进行试管凝固酶试验。试管法：吸取1：4新鲜血浆 0.5ml，放灭菌小试管中，加入等量待检菌24h肉汤培养物0.5ml。混匀，放35℃±2℃温箱或水浴中，每半小时观察一次，24h 之内呈现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物各0.5 ml作为阳性与阴性对照。

(2) 结果报告

   凡在琼脂平板上有可疑菌落生长，镜检为革兰阳性葡萄球菌，并能发酵甘露醇产酸，血浆凝固酶试验阳性者，可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。